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尊龙凯时(中国区)人生就是搏:细胞培养包被液全解析

来源:禄仁娟 日期:2025-03-25

什么是包被细胞培养瓶试剂?包被试剂是一种用于处理细胞培养瓶、培养板或培养皿表面的化学物质,能够模拟细胞在体内的生长环境,促进细胞的附着、铺展和增殖。通过包被处理,培养表面可以更好地支持细胞的生长和功能表达。本文将为您详细介绍几种常用的包被试剂及其特点,并分享包被操作的注意事项,助您轻松提升细胞培养效果!

尊龙凯时(中国区)人生就是搏:细胞培养包被液全解析

常见的包被细胞培养试剂及其使用方法

01 明胶(Gelatin)

明胶是常用于包被细胞培养板或培养皿的试剂,可以有效促进细胞的贴壁和增殖,具有良好的生物相容性和细胞黏附性。适用细胞包括胚胎干细胞、间充质干细胞及内皮细胞等。其特点为价格低廉、易于使用,能够提供良好的细胞附着支持。使用浓度范围为1-20mg/ml,包被体积通常完全覆盖培养瓶底部,常为T-25瓶25ml,T-75瓶75ml。包被条件为37°C孵育≥2小时或4°C过夜,使用前需吸除多余明胶溶液,并用PBS洗涤1-2次后接种细胞。

02 多聚赖氨酸(PLL)

多聚赖氨酸(PLL),相对分子量为70,000~300,000,是细胞培养中常用的细胞黏附剂,能够促进细胞的粘附和贴壁。适用细胞包括神经元细胞、原代细胞及悬浮细胞等。其通过静电作用增强细胞附着,特别适合难以贴壁的细胞。常用浓度为0.01%至0.1%(w/v),包被条件为37°C孵育≥2小时或4°C过夜,使用前需吸除多余溶液,并用无菌PBS冲洗1-2次。

03 重组人纤连蛋白(FN)

重组人纤连蛋白(FN)是一种重要的细胞外基质蛋白,具有多种生物学功能。作为高分子量的糖蛋白,它能够与细胞表面和细胞外基质中的多种组分结合。适用细胞包括干细胞、间充质干细胞、内皮细胞及肿瘤细胞等。其优势在于提高细胞的贴壁率,增强细胞的代谢水平,并缩短细胞生长时间。常用浓度为1µg/cm²至10µg/cm²,包被条件同样为37°C孵育≥2小时或4°C过夜。

04 鼠尾胶原蛋白Ⅰ型包被液(1mg/mL)

鼠尾胶原蛋白是主要为Ⅰ型胶原蛋白,广泛适用于内皮细胞、肝细胞及肌肉细胞的培养,能够模拟细胞外基质的环境。适用细胞包括上皮细胞、肝细胞及肌细胞等。其特点在于可以制备成清晰的凝胶,提供3D基质或涂覆在组织培养板上,以促进细胞贴壁和增殖。常用浓度为1-5ug/cm²,包被体积为T-25瓶25ml去离子水+50μl(1MG/ML鼠尾胶原蛋白Ⅰ),随后在4°C放置过夜,吸出溶液并用PBS洗涤2-3次后可接种细胞。

包被操作注意事项

1. 无菌操作:所有操作应在无菌条件下进行,以避免污染。

2. 均匀覆盖:确保包被试剂均匀分布,以免局部过厚或过薄。

3. 浓度优化:根据细胞类型和实验需求优化包被试剂浓度。

4. 孵育时间:请根据试剂及实验要求调整孵育时间,以确保充分包被。

5. 储存条件:包被后的培养瓶应短期储存于4°C,但建议尽快使用以确保最佳效果。

通过选择合适的包被试剂,遵循正确的包被步骤,您可以有效提高细胞的贴附和生长,从而为后续实验提供可靠的细胞模型。此外,选择尊龙凯时(中国区)人生就是搏产品,可以为您的细胞培养带来更高的效率与可靠性。

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