尊龙凯时(中国区)人生就是搏推出的哺乳动物蛋白提取试剂盒，包含多个成分，旨在为生物医学研究提供优质的蛋白质提取服务。该试剂盒的组成如下：5X缓冲液10ml、5X氯化钠10ml、5X十二烷基硫酸钠10ml、5X去氧胆酸盐10ml、5X NP-40 10ml，以及20X磷酸盐缓冲盐水10ml。同时，试剂盒中还配备了0.5ml蛋白酶抑制剂混合液以保护样本中的蛋白质。

对于储存条件，本试剂盒可在常温下保存，但蛋白酶抑制剂混合液需保存在-20°C，且整体保质期为24个月。

提取步骤

步骤1: 准备细胞裂解缓冲液：根据5X缓冲液、5X氯化钠、5X十二烷基硫酸钠、5X去氧胆酸盐和5X NP-40，以1:1:1:1:1（v/v）的比例配制细胞裂解缓冲液。每1ml的细胞裂解缓冲液适用于提取106~107个细胞或5~20mg的组织样品。在使用前，向其中加入10μl的蛋白酶抑制剂混合液。

步骤2: 细胞或组织的处理：

a. 对于贴壁细胞：去除细胞培养基，用PBS缓冲液冲洗细胞两次，随后加入细胞裂解缓冲液（106~107个细胞/ml）。将细胞置于冰袋中，在摇床上孵育30分钟，并间歇性重悬细胞，最后刮取并收集裂解液。

b. 对于悬浮细胞：在700xg离心5分钟，弃去上清液。用PBS重悬洗涤细胞两次，在4°C下离心并去除上清液。将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液中（106~107个细胞/ml），并在冰袋中孵育30分钟。

c. 对于组织样本：将组织切成小块，并用PBS冲洗两次。加入细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），将样品移至预冷的微量匀浆器中，并在冰上均匀化组织30~50次，确保均质对目标蛋白的功能完整性至关重要。最后，进行12,000xg、10分钟的离心以沉淀细胞碎片，或进行100,000xg、45分钟的高速离心以制备蛋白质溶液。

步骤3: 保存蛋白质溶液：将含有蛋白质的上清液转移至冷冻管中，可在冰上保存以便立即使用，或将其保存于-70°C以长期保存。

使用尊龙凯时(中国区)人生就是搏的哺乳动物蛋白提取试剂盒，将保护您实验中的宝贵蛋白质，确保其在各种生物医学应用中的有效性与功能性。